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庖丁解牛!讓我們從原理上重新審視分光光度計!

更新時間:2021-12-31      點擊次數:1494

DR6000.png

哈希 DR6000分光光度計

原理
    物質的吸收光譜本質上就是物質中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量,相應地發生了分子振動能級躍遷和電子能級躍遷的結果。由于各種物質具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結構,其吸收光能量的情況也就不會相同,因此,每種物質就有其*的、固定的吸收光譜曲線,可根據吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質的含量,這就是分光光度定性和定量分析的基礎。分光光度分析就是根據物質的吸收光譜研究物質的成分、結構和物質間相互作用的有效手段。紫外可見分光光度法的定量分析基礎是朗伯-比爾(Lambert-Beer)定律。即物質在一定濃度的吸光度與它的吸收介質的厚度呈正比,其數學表示式如下:
                                                               A= abc
式中: A—吸光度; a—摩爾吸光系數; b—吸收介質的厚度; c—吸光物質的濃度。

光學系統原理
    由光源鎢燈和氛燈發出的復合光經由步進電機控制帶動反光鏡M1,反射通過入射狹縫,并進入單色器中,光柵衍射出的單色光經準直鏡M2調焦,會聚通過出射狹縫,光束到達斬光器時,一段時間內的光射成為參比光路,另一段時間內的光透射成為樣品光路。后兩光交替地照射在檢測器(光電倍增管)(圖2)。

分光——光學系統.png

電器系統原理
光電倍增管檢測出的信號經由前置放大器,驅動卡傳遞給微機控制器,由微機控制器推動驅動卡居中協調各部分(圖3)。

分光——電氣原理.png

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